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DNA亲子鉴定怎么鉴定?需要多少血量?做亲子鉴定的样本很多,不一定非要是血液,不过在鉴定机构往往使用最多的就是血液,因为血液采集比较方便,而且血液里面含DNA比较丰富,检测也比较精准。下面我们就一起走进广东DNA鉴定中心鉴定中心,在实验室主任杨璐瑜的带领下,一起揭开DNA亲子鉴定的神秘面纱。
DNA亲子鉴定怎么鉴定?
第一步:采血提取DNA
本次实验以采集血样进行DNA鉴定。
杨主任告诉我们:“血样采集其实跟抽血一样,我们只需要在静脉血管中抽取1毫升血液即可。不是大家认为的几百CC的血液,没那么夸张。”
实验人员把采集的血液置于含抗凝剂的1.5毫升离心管中。接下来在PCR实验室DNA提取间,实验人员取少许血液,在其中加入DNA提取液。杨主任表示,之所以加入提取液是为了将细胞中的DNA提取出来,去除其他物质,这样能够更好地进行检测。
第二步:扩增DNA
当DNA提取完成后,实验人员再取出DNA检测试剂盒,在无菌超净台内加样,实验人员的双手在超净台内操作,确保实验在一个相对安全、无菌的环境下进行。
实验人员在新的试管中加入了2微升的DNA,2微升的蒸馏水,6微升的亲子鉴定试剂,据了解,亲子鉴定试剂里面包括酶、引物等试剂,加入了所有的试剂后,实验人员把试剂在混匀器上混匀,让试剂和DNA样本能够充分混合。杨主任解释到,虽然之前提取了一些DNA,但并不全是我们需要的靶基因,量也不多。为此,第二步要在PCR扩增间进行扩增,就是通过引物扩增人体DNA上的靶基因,直到达到所需的量为止。
我们看到,实验人员把小试管放入扩增仪中,通过变性、退火、复性的循环,靶基因得到循环往复的复制,从而扩增出我们所需的靶基因数量,以便之后的操作。
第三步:电泳比对位点
经过3小时的扩增,实验人员把试管取出,冷却后,开始最后一个环节--电泳。实验人员把DNA产物和电泳试剂混合后放入一个叫做3500荧光自动测序仪当中进行检测。杨主任表示,这个仪器将会自动从试管中提取DNA产物,然后进行电泳,根据DNA片断的长短和不同颜色荧光进行16个位点DNA分析。
结果终于出来了,实验人员在做最后的结果比对,分析结果计算概率,然后进行最后的结论。我们在电脑上看到,有多组荧光DNA峰,像心电图一样,杨主任告诉我们,现在看到的就是位点的比对,这个位点就是这个凸起来的高峰和子女的这个正好对上,以此类推,就能算出多少个位点对上,当然这个还需要工作人员的概率计算。
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